吃进去的 “颜色”，正在悄悄伤害身体｜11 种合成着色剂的测定

P40四元梯度泵，A10C自动进样器，C10柱温箱，D20二极管阵列检测器

乙醇氨水溶液：量取无水乙醇700 mL，加入4 mL氨水，用水稀释至1 L，混匀。

5%甲醇水溶液：移取甲醇5 mL，用水稀释并定容至100 mL，混匀。

2%氨水甲醇溶液：移取2 mL氨水，用甲醇稀释至100 mL。

乙酸铵溶液（20 mmol/L）：称取1.54 g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000 mL。

乙酸铵缓冲溶液，pH 9.0：乙酸铵溶液加氨水调pH至9.0。

2%甲酸水溶液：移取甲酸2 mL，用水稀释至100 mL。

靛蓝标准储备液（1 mg/mL）：准确称取靛蓝二磺酸钠（食品蓝2），用水定容至刻度。

混合标准中间液（50 µg/mL）：准确移取10种食品合成着色剂混标（1000mg/L）0.5 mL 和靛蓝标准储备液0.5 mL至10 mL容量瓶中，用水定容至刻度。

标准工作溶液配制：分别吸取混合标准中间液0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL 和10.0 mL于50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，分别得到浓度为0.2 µg/mL、0.5 µg/mL、1.0 µg/mL、2.0 µg/mL、5.0 µg/mL和10.0 µg/mL的标准工作溶液。

样品提取：准确称取试样2 g，置于50 mL 具塞离心管中，先加入水5 mL，50 ℃水浴加热混匀样品，加入25 mL 乙醇氨水溶液，涡旋1 min，50 ℃超声提取20min，8000 r/min离心5 min，取上清液置于50 mL容量瓶中，每次加入约10 mL乙醇氨水溶液重复提取操作至上清液无明显颜色，离心后合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50 mL，即得提取液。准确吸取提取液10 mL，50 ℃氮气浓缩至3 mL左右，分2~3次共加入10 mL 5%甲醇水溶液溶解，作为待净化液。

样品净化：

a.依次用6 mL甲醇和6 mL水活化SPE柱；

b.以2s~3s 1滴的流速加载净化液到SPE柱；

c.用6 mL 2%甲酸水和6 mL甲醇淋洗SPE柱，弃去淋洗液，抽真空至近干

d.用6 mL 2%氨化甲醇分两次加入，流速低于2s~3s 1滴。收集洗脱液在50 ℃氮气浓缩至近干，准确加入2 mL pH为9.0的乙酸铵缓冲溶液，过滤，作为待测液。

流动相：A：乙酸铵溶液、B：甲醇

色谱柱：Lotus C18 色谱柱，4.6mm*250mm，5µm

进样量：20 µL

柱温：30 ℃

检测波长：415nm（柠檬黄、喹啉黄）、520nm（新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、YH红、酸性红、赤藓红）、610nm（靛蓝、亮蓝）

梯度洗脱表：