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更新时间:2026-03-12
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食品抗氧化剂能阻止或延缓食品氧化变质、提高食品稳定性、延长贮存期。氧化不仅使食品中的油脂变质,而且还会使食品褪色、变色和破坏维生素等,从而降低食品的感官质量和营养价值,甚至产生有害物质,引起食物中毒。所以应合理使用抗氧化剂。本应用方案参考《GB 5009.32-2016 食品中9种抗氧化剂的测定》,对某品牌的葵花籽油进行了9种抗氧化剂(没食子酸丙酯PG、2,4,5-三羟基苯丁酮THBP、叔丁基对苯二酚TBHQ、去甲二氢愈创木酸NDGA、叔丁基对羟基茴香醚BHA、2,6-二叔丁基-4-Hydroxybenzyl alcohollonox-100、没食子酸辛酯OG、2,6-二叔丁基对C7H8O酚BHT、没食子酸十二酯DG)的含量测定。
P60输液泵、A10C自动进样器、C10柱温箱、D10紫外检测器

分别吸取9种抗氧化剂混标(浓度为1 mg/mL)适量,用乙腈稀释至浓度为20 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL的混合标准工作溶液。
试样提取:准确称取混合均匀的试样1 g(精确至0.01g)于50 mL离心管中,加入3 mL乙腈饱和的正己烷溶液溶解样品,涡旋1 min,静置10 min,用3 mL含AP(L-抗坏血酸棕榈酸酯)的正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2 min,3000 r/min离心5 min,收集乙腈层于另一50 mL离心管中,再重复使用3 mL含AP的正己烷饱和的乙腈溶液提取4次,合并5次提取液,待上样。同时做空白试验。
试样净化:在C18固相萃取柱中装入约2g的无水Na₂SO₄,用5 mL甲醇活化萃取柱,再以5 mL乙腈平衡萃取柱,弃去流出液。将上述所有提取液倾入柱中,用50 mL的离心管收集流出液,再以15 mL的乙腈:甲醇(2:1)洗脱,一起收集氮吹。氮吹至1 mL左右,转移至10 mL离心管中,用少量乙腈润洗50 mL离心管 3次,合并后氮吹至0.5 mL,用乙腈定容至2 mL,涡旋 30 s,过0.22 μm微孔滤膜至进样瓶中,供液相色谱测定。
色谱柱:Lotus C18(4.6 mm*250 mm,5 μm)
柱温:35 ℃
进样体积:10 μL
波长:280 nm
流动相A:0.5 %的甲酸溶液
流动相B:甲醇
流速:1.0 mL/min
梯度表:


图1 9种抗氧化剂标准溶液色谱图
( 1—PG; 2—THBP;3—TBHQ;4-BHA;5—NDGA;6—lonox-100;7—OG;8—BHT;9—DG)
表1 抗氧化剂标准曲线结果表

将100 μg/mL浓度的溶液重复进样6次,重复性结果如表2所示
表2 抗氧化剂重复性结果表

对某品牌的葵花籽油进行测试,9种抗氧化剂均未检出。在样品中添加25 μg/mL的9种抗坏血酸,回收率结果如表3所示。

图2 9种抗氧化剂样品空白(红色)和样品加标(绿色)色谱图
表3 加标回收率结果表

本方案采用科诺美Leaps超高效液相色谱仪,参考《GB 5009.32-2016 食品中9种抗氧化剂的测定》,进行了食品中9种抗氧化剂的方法学考察,线性良好,相关系数均大于0.999;保留时间重复性均小于0.15%,峰面积重复性均小于1.00%;葵花籽油中9种抗氧化剂加标回收率在83.72%~102.20%之间;本方法操作简单,稳定性好,灵敏度高,适用于食品中9种抗氧化剂的测定。
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